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This Adverse Outcome Pathway (AOP) describes the linkage between Chitin synthase 1 inhibition and mortality in arthropods. In order to grow and develop, arthropods need to shed their exoskeleton (or cuticle) periodically and replace it with a new one in a process called molting. Successful molting, and therefore a successful development necessitates stability and integrity of the cuticle to support muscular contractions involved in the shedding of the old cuticle. Arthropods heavily rely on chitin synthesis as chitin is one of the main constituents of the cuticle. The cuticular chitin synthase (CHS-1) is the key enzyme in the biosynthetic pathway and arthropods are therefore especially dependent on its proper function. The present AOP describes the effects of CHS-1 chemical inhibition on the molting process leading to increased mortality in arthropods. Knowledge gaps still exist in the process and this AOP may help guiding assay development for further experimental studies, addressing these gaps. This AOP is referred to as AOP 360 in the Collaborative Adverse Outcome Pathway Wiki (AOP-Wiki).

This Adverse Outcome Pathway (AOP) describes the linkage between Thyroperoxidase inhibition and increased mortality via reduced anterior swim bladder inflation. The swim bladder is a gas-filled organ found in many bony fish species and typically consists of two gas-filled chambers. The posterior chamber inflates during early development (embryo), while the anterior chamber inflates during late development (larva). Both chambers are important for fish to control buoyancy and the anterior chamber has an additional role in hearing. This AOP is part of a network of 5 AOPs describing how disruption of the thyroid hormone system can affect developmental processes involved in swim bladder inflation. The network includes three molecular initiating events representing the inhibition of enzymes that are important for thyroid hormone synthesis and activation. It describes how inhibition of thyroperoxidase and/or deiodinase, leads to reduced swim bladder inflation, resulting in reduced swimming performance, increased mortality and ultimately, decreased population trajectory in fish. This AOP network is currently mainly based on experimental evidence from studies on fish species with a two-chambered swim bladder. This AOP is referred to as AOP 159 in the Collaborative Adverse Outcome Pathway Wiki (AOP-Wiki).

La présente Ligne directrice pour les essais (LD) décrit une procédure de détermination de la surface spécifique en volume (Volume Specific Surface Area – VSSA) de nanomatériaux manufacturés solides en poudre. La VSSA (en m2/cm3) d’un matériau est calculée en multipliant la surface spécifique (en m2/g) par la densité squelettique (en g/cm3). La présente Ligne directrice explique comment déterminer la SSA externe et interne de nanomatériaux manufacturés solides en poudre à l’aide de la méthode Brunauer, Emmett et Teller (BET). Cette Ligne directrice explique également comment déterminer la densité squelettique (ρ) des nanomatériaux manufacturés par pycnométrie à gaz.

La présente ligne directrice, couvrant les nanomatériaux de taille 1 nm à 1000 nm, est consacrée aux mesures de taille et de distribution granulométrique des particules de nanomatériaux. Elle comprend les méthodes suivantes : microscopie à force atomique (AFM, Atomic Force Microscopy), sédimentation par centrifugation en phase liquide (CLS, Centrifugal Liquid Sedimentation) /ultracentrifugation analytique (AUC, Analytical Ultracentrifugation), diffusion dynamique de la lumière (DLS, Dynamic Light Scattering), système d’analyse différentielle de mobilité électrique (DMAS, Differential Mobility Analysis System), analyse par traçage des (nano)particules (PTA/NTA, (Nano)Particle Tracking Analysis), diffusion des rayons X aux petits angles (SAXS, Small Angle X-Ray Scattering), microscopie électronique à balayage (MEB) et microscopie électronique à transmission (MET). Pour la mesure du diamètre et de la longueur des fibres, l’analyse d’images obtenues au microscope électronique est la seule méthode disponible actuellement.

La présente ligne directrice décrit des méthodes d’étude de la transformation des produits chimiques dans le lisier de porcs ou de bovins en conditions anaérobies. Les essais réalisés visent à déterminer la vitesse de transformation du produit chimique d’essai, l’identité et la vitesse de formation et de disparition des produits de transformation, la quantité de produit chimique d’essai qui est minéralisée en CO2 ou CH4 ou transformée en produits volatils, et la quantité de résidus non extractibles. Ces études sont applicables aux produits chimiques administrés aux animaux d’élevage puis excrétés (médicaments vétérinaires ou additifs alimentaires, par exemple), ainsi qu’aux produits chimiques qui sont utilisés dans les locaux d’élevage et peuvent se retrouver dans le lisier provenant de ces bâtiments (biocides, par exemple). Des pesticides peuvent également être introduits dans le lisier par le biais d’aliments pour animaux contaminés.

La Ligne directrice décrit l’essai in vivo de mutation du gène Pig-a sur érythrocytes de mammifères qui utilise un gène endogène de mammifère, le gène de classe A phosphatidylinositol-glycane (Pig-a), comme rapporteur de mutation d’un gène de cellule somatique. Les tests de mutation génique in vivo tels que l’essai Pig a se prêtent particulièrement bien à l’évaluation de la mutagénicité, car une série de facteurs physiologiques tels que l’absorption du produit chimique d’essai à partir du site d’exposition, sa distribution dans l’ensemble du système d’essai par la circulation systémique, ainsi que les processus in vivo du métabolisme et de la réparation de l’ADN, contribuent aux réponses mutagéniques. L’essai Pig-a peut être pratiqué sur les souches communément utilisées de rats ou de souris (1) (voir paragraphe 28), et ne nécessite pas d’euthanasier les animaux. Ces caractéristiques facilitent l’intégration de l’essai Pig a à de nombreux protocoles d’essai in vivo sur des rongeurs.

Cette Ligne directrice propose des approches définies (AD) combinant les données générées par des méthodes in vitro, avec des sources d’information telles que les propriétés physico-chimiques. La prédiction découlant d’une AD peut être utilisée seule pour déterminer le danger potentiel pour l’œil, selon les catégories de dangers définies par le SGH de l’ONU (catégories 1 ou 2, ou non classé). Une AD est une procédure établie d’interprétation des données (modèle mathématique ou approche fondée sur des règles, par exemple), qu’on applique à des données (prédictions in silico, données in chemico, données in vitro, par exemple) produites avec un ensemble défini de sources d’information pour en tirer une prédiction sans qu’il soit nécessaire de recourir à un jugement d’expert. Les AD dont il est question ici fournissent des informations que l’on peut utiliser pour identifier le danger pour l’œil.

La présente Ligne directrice décrit une procédure in vitro d’identifier à elle seule les produits chimiques (substances et mélanges) qui ne relèvent d’aucune catégorie (« sans catégorie ») ou qui nécessitent d’être classés pour irritation oculaire (catégorie 2) ou pour lésions oculaires graves (catégorie 1) selon la classification des dangers pour l’œil établie par le SGH de l’ONU. Un modèle d’épithélium cornéen humain reconstitué (EChR) est utilisé, qui reproduit fidèlement les propriétés histologiques, morphologiques, biochimiques et physiologiques de l’épithélium cornéen humain. Le test évalue le danger potentiel qu’un produit chimique testé présente pour l’œil en se fondant sur sa capacité à provoquer une cytotoxicité sur un modèle tissulaire d’EChR, mesurée avec le test MTT. Dans la méthode TTT ECh SkinEthic™, la viabilité tissulaire de l’EChR est mesurée via la conversion enzymatique du MTT par les cellules viables du tissu en formazan coloré mesuré quantitativement après son extraction des tissus. La cytotoxicité est mesurée à différents moment de l’exposition ; cela constitue une des différences méthodologiques avec le Ligne directrice 492 d’origine.

Cette méthode permet l’estimation de la CL50 avec un intervalle de confiance, et les résultats permettent de classer une substance pour la toxicité aiguë selon le Système Général Harmonisé de Classification et d'Étiquetage des Produits Chimiques. Il est le plus facile de l'appliquer aux substances produisant la mort dans les deux jours. Cette Ligne directrice utilise des rongeurs (de préférence femelle rat). Il y a un essai limite et un essai principal. L'essai limite peut être employé efficacement pour identifier les produits chimiques qui sont susceptibles d'avoir une basse toxicité. La substance d'essai est généralement administrée par une dose unique, par gavage, aux animaux à jeun avant le traitement. Des animaux uniques sont dosés un par un, habituellement toutes les 48h. Le premier animal est dosé un niveau au-dessous des meilleures évaluations préliminaires de la CL50. Le deuxième animal reçoit une dose inférieure (si le premier animal meurt) ou une dose supérieure (si le premier animal survit). On observe les animaux avec une attention particulière pendant les 4 premières heures et quotidienne ensuite, pendant un total de 14 jours généralement. Le poids des animaux devrait être déterminé au moins une fois par semaine. Tous les animaux devraient être soumis à une autopsie générale. La CL50 est calculée suivant la méthode de maximum de vraisemblance. Il est possible de calculer des évaluations d'intervalle pour la CL50. Plus l'intervalle est étroit et meilleure est l'évaluation de la CL50. Logiciel à utiliser pour les essais 425, 432, 455. Cliquer ici. Logiciel non couvert par l’Acceptation Mutuelle des Données.